PLT VASP/P2Y12 Kit(cat7014)#流式检测试剂盒说明书

PLT VASP/P2Y12 流式检测试剂盒

1 简介：

血管扩张刺激磷蛋白（VASP）是一种重要的细胞内血小板蛋白，基础状态下处于非磷酸化状态。其磷酸化，是受cAMP (环磷酸腺苷) 级联调节。前列腺素E1(PGE1)会激活级联反应，然而这种级联调节通过P2Y12蛋白受体被ADP抑制。

在检测时，VASP的磷酸化与P2Y12受体抑制效应密切相关，而VASP的非磷酸化状态与P2Y12 受体激活相关。

噻氯匹定和氯吡格雷对血小板受体的抑制作用是不可逆的。这种效应通过PGE1的激活，同时ADP的加入，而使VASP保持磷酸化，而被证实。

本试剂盒利用双色流式细胞测定术，通过VASP的磷酸化状态的测定，从而检测P2Y12受体活性。

2 方法：

先将全血单独与PGE1孵育或与PGE1+ADP混合孵育。细胞渗透后，处于磷酸化状态的VASP通过间接免疫荧光反应特异性的被单克隆抗体标记。使用双色流式细胞分析测定单独PGE1激活的和PGE1联合ADP处理管的校准平均荧光强度（mean fluorescence intensities,MF1），经减去空白对照得到校正后的MFIc，即减去阴性对照之后的平均荧光强度。再计算血小板反应指数（Platelet reactivity index，PRI），即VASP磷酸化水平，评估标本中ADP抑制VASP磷酸化的程度。

3 试剂组成

注：提供Reagent 2a和Reagent 2b是过剩的。

4 需要自备的试剂

 1）旋涡混匀器

 2）计时器

 3）流式细胞仪

 4）移液器、枪头

 5）上样管